Как и другие члены семейства продуктов Cells-to-CT™, набор Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ позволяет проводить анализ экспрессии непосредственно из культивируемых клеток без очистки РНК.

Это новое дополнение к семейству включает мастер-микс TaqMan™ 1-Step RT-PCR. Формат шага RT-PCR в одной пробирке оптимизирует рабочий процесс «образец-ответ» больше, чем когда-либо. Сочетание простой технологии лизиса Cells-to-CT™ с возможностью быстрого цикла мастер-микса RT-PCR 1-step позволяет быстрее получать результаты при ограниченном количестве обработки образцов.

Набор Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™:
• Полный — оптимизированный рабочий процесс включает реагенты для лизиса клеток с удалением геномной ДНК и основную смесь TaqMan™ 1-Step RT-PCR
• Быстрее, чем когда-либо — 7-минутная подготовка образца, включая обработку ДНКазой, в сочетании с 28-минутным этапом ОТ-ПЦР в реальном времени позволяют получить ответ за ~35 минут
• Простой — всего 10 этапов (подготовка образца и ОТ-ПЦР в реальном времени вместе)
• Надежный — проводите анализ экспрессии генов на 10–100 000 клеток на образец; результаты эквивалентны результатам очищенной РНК
• Удобный — содержит достаточно реагентов для проведения 5 ОТ-ПЦР в реальном времени для каждого подготовленного вами образца клеток; это позволяет изучать несколько мишеней или проводить повторные ОТ-ПЦР

Примечание: наборы праймеров/зондов TaqMan™ продаются отдельно.

Простая 7-минутная подготовка образца, затем готовность к ОТ-ПЦР в реальном времени
Независимо от того, используете ли вы планшеты или пробирки, набор Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ использует простую 7-минутную процедуру подготовки образца. Технология лизиса разработана для 10–100 000 культивируемых клеток/образец. Клетки промываются в PBS и лизируются в растворе в течение 5 минут при комнатной температуре с одновременной обработкой ДНКазой. Лизис прекращается при комнатной температуре 2-минутной инкубацией с помощью Stop Solution. Теперь лизат готов к анализу на вашем инструменте для ОТ-ПЦР в реальном времени. Просто добавьте его в основную смесь ОТ-ПЦР в реальном времени, содержащую интересующие вас наборы праймеров/зондов TaqMan™. В качестве альтернативы лизат можно хранить при температуре –20 °C. Поскольку образцы можно обрабатывать непосредственно в лунках для культивирования (96 или 384 лунок), обработка образцов и вероятность потери образцов или ошибки переноса сведены к минимуму, что обеспечивает быструю высокопроизводительную обработку. В отличие от устаревших многоступенчатых протоколов выделения РНК, не требуется нагревания, промывки или центрифугирования. Набор значительно упрощает трудоемкий процесс продолжительностью 30–60 минут и сокращает его до 7 минут.

Полное, проверенное решение
Все компоненты набора Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ были оптимизированы для обеспечения стабильной и надежной производительности. Это устраняет необходимость в догадках, связанных с раздельной подготовкой образцов и 1-шаговой ОТ-ПЦР в реальном времени. Для дополнительной гарантии качества набор Cells-to-CT™ 1-Step TaqMan™ был проверен с помощью анализов экспрессии генов TaqMan™ и демонстрирует производительность, эквивалентную полученной с очищенной РНК.

Вспомогательный продукт
Набор контролей TaqMan™ Cells-to-CT™ был разработан для использования с продуктами TaqMan™ Cells-to-CT™. Этот набор содержит эндогенный контроль (ACTB) для нормализации вариабельности загрузки образца и искусственный контроль XenoRNA™ и соответствующий анализ экспрессии генов TaqMan™ для мониторинга эффектов ингибирования ПЦР.