Анализ белка Pierce Bradford Plus — это готовый к использованию, совместимый с восстановителем, улучшенный реагент для анализа Брэдфорда, позволяющий быстро измерить общую концентрацию белка по сравнению со стандартным белком. Анализ реагента Pierce Bradford Plus обеспечивает повышенную линейность и вдвое меньшую вариабельность между белками по сравнению с другими коммерческими формулами анализа Брэдфорда.

Сравните все доступные анализы Брэдфорда ›

Характеристики анализа белка Bradford Plus включают:
• Колориметрический — измерение с помощью стандартного спектрофотометра или планшетного ридера при 595 нм
• Простота использования — один реагент; подготовка рабочего реагента не требуется
• Быстрота — почти немедленное проявление цвета; добавьте, смешайте и прочитайте результаты
• Диапазон анализа — определяет концентрацию белка в диапазоне от 1 до 1500 мкг/мл
• Лучше — улучшенная линейность и однородность отклика по сравнению с традиционными формулами Брэдфорда
• Гибкость — предусмотрены протоколы для микропланшетов и кювет, которые можно адаптировать к нескольким целевым рабочим диапазонам

Реагент для анализа Pierce Bradford Plus — это единый, готовый к использованию раствор для измерения концентрации белка. Просто добавьте реагент к равным объемам образцов и стандартов, перемешайте, а затем измерьте поглощение при 595 нм. Анализ можно проводить как в пробирке, так и в формате микропланшета. Анализ белка совместим с большинством солей, растворителей, буферов, тиолов, восстанавливающих веществ и хелатирующих агентов металлов, встречающихся в образцах белка.

Как анализ Bradford Plus обнаруживает белок
Использование красителя Coomassie G-250 в колориметрическом реагенте для обнаружения и количественного определения общего белка было впервые описано доктором Мэрион Брэдфорд в 1976 году. В кислой среде реагента белок связывается с красителем Coomassie. Это приводит к спектральному сдвигу от красновато-коричневой формы красителя (максимум поглощения при 465 нм) к синей форме красителя (максимум поглощения при 610 нм). Разница между двумя формами красителя наибольшая при 595 нм, поэтому это оптимальная длина волны для измерения синего цвета от комплекса красителя Coomassie-белка. При желании синий цвет можно измерить на любой длине волны между 575 нм и 615 нм. На двух крайних значениях (575 нм и 615 нм) наблюдается потеря около 10% в измеренном количестве цвета (поглощения) по сравнению с полученным при 595 нм.

Развитие цвета в анализах белков на основе красителя Кумасси (Брэдфорд) связано с наличием определенных основных аминокислот (в первую очередь аргинина, лизина и гистидина) в белке. Силы Ван-дер-Ваальса и гидрофобные взаимодействия также участвуют в связывании красителя белком. Количество лигандов красителя Кумасси, связанных с каждой молекулой белка, приблизительно пропорционально количеству положительных зарядов, обнаруженных на белке. Свободные аминокислоты, пептиды и низкомолекулярные белки не дают цвета с реагентами красителя Кумасси. В общем, масса пептида или белка должна быть не менее 3000 дальтон для анализа с этим реагентом.