Thermo Scientific DNase I удаляет нежелательную ДНК из клеточных лизатов для повышения эффективности извлечения белка.

Характеристики ДНКазы I без РНКазы:

• Разрушает и удаляет нежелательную ДНК из образцов
• Расщепляет как одноцепочечную, так и двухцепочечную ДНК
• Совместима с реагентами для лизиса клеток Thermo Scientific Pierce
• Снижает вязкость бактериальных лизатов (белковых экстрактов) для облегчения пипетирования

Дезоксирибонуклеаза I (ДНКаза I) — это одиночный гликозилированный полипептид, который разрушает нежелательную одно- и двухцепочечную ДНК. Фермент работает путем расщепления ДНК на 5'-фосфодинуклеотид и небольшие олигонуклеотидные фрагменты. ДНКазу I обычно добавляют в реагенты для лизиса клеток для удаления вязкости, вызванной содержанием ДНК в лизатах бактериальных клеток или для удаления шаблонов ДНК из РНК, полученных в результате транскрипции in vitro . ДНКаза без РНКазы полезна для любых приложений, требующих переваривания ДНК, в которых крайне важно избежать повреждения РНК.

Общая информация об использовании ДНКазы I:

• Для активности ДНКазы I необходимы ионы кальция. Следовые количества Ca++ могут присутствовать в достаточно высокой концентрации для того, чтобы ДНКаза I была активной, однако использование EGTA или буферов без кальция может снизить активность ДНКазы I до неопределяемых уровней.
• Высокие уровни (т. е. 100 мМ) одновалентных ионов, таких как Na+ и K+, снижают активность ДНКазы I.
• ДНКаза I инактивируется при нагревании до 65 °C в течение 10 минут.
• Единица Куница: 1 единица Куница — это количество фермента, необходимое для увеличения на 0,001 A260 нм/мин/мл при 25 °C в 0,1 М NaOAc, pH 5,0 из-за деградации высокополимеризованной ДНК.
• Единицы анализа деградации: 1 единица определяется как количество фермента, необходимое для полной деградации 1 мкг плазмидной ДНК за 10 минут при 37 °C в 10 мМ Трис-HCl, pH 7,5, 50 мМ MgCl 2 , 13 мМ CaCl 2 .

Характеристики:

• Количество: 1000 единиц (1 мл)
• Концентрация: 1 единица/мкл ±20%
• Определение единицы: 1 единица полностью разрушает 1 мкг плазмидной ДНК за 10 минут при 37°C. Одна единица ДНКазы I эквивалентна 0,3 единицам Кунитца.
• Загрязнение РНКазой: активность рибонуклеазы не обнаруживается на основе инкубации с транскриптом РНК.
• Источник: E. coli , содержащая клонированный ген, кодирующий бычью ДНКазу I
• Молекулярный вес: прибл. 29 000
• Состав: бычья ДНКаза I в 50 мМ Трис-HCl (pH 7,5), 10 мМ CaCl 2 , 50% глицерина
• Поставляется с: 1 мл 10X реакционного буфера 100 мМ Трис-HCl (pH 7,5), 25 мМ MgCl 2 , 1 мМ CaCl 2 , 50 мМ ЭДТА