Набор Thermo Scientific EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotinylation содержит реагенты, достаточные для 10 реакций биотинилирования (например, 1–10 мг антитела на реакцию). Реагент EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotin, включенный в набор, представляет собой водорастворимый реагент биотинилирования средней длины для маркировки антител, белков и других молекул, содержащих первичные амины.

Особенности EZ-Link Sulfo-NHS-LC-Biotin:

• Маркировка белков — биотинилируют антитела для облегчения иммобилизации, очистки или обнаружения с использованием стрептавидиновых смол или зондов
• Маркировка клеточной поверхности — биотинилируют только поверхностные белки целых клеток, поскольку отрицательно заряженный реагент не проникает в клеточные мембраны
• Аминореактивный — реагирует с первичными аминами (-NH2), такими как боковые цепи лизина или аминоконцы полипептидов
• Растворимый — заряженная сульфо-NHS-группа увеличивает растворимость реагента в воде по сравнению с обычными соединениями NHS-эфира
• Необратимый — образует постоянные амидные связи; спейсерная группа не может быть расщеплена
• Средняя длина — спейсерная группа (общая длина, добавленная к мишени) составляет 22,4 ангстрема; обеспечивает превосходный баланс между адекватной длиной (минимальные стерические препятствия для связывания биотина) и скромной массой.

Sulfo-NHS-LC-Biotin — один из трех очень похожих реагентов EZ-Link, которые растворимы в воде, нерасщепляются и обеспечивают простое и эффективное биотинилирование антител, белков и любых других макромолекул, содержащих первичные амины, в растворе. Специфическая маркировка белков клеточной поверхности — еще одно распространенное применение этих уникально растворимых в воде и непроницаемых для мембран реагентов. Различаясь только длиной спейсерных плеч, три реагента Sulfo-NHS-ester предлагают возможность оптимизации экспериментов по маркировке и обнаружению, где стерические препятствия связыванию биотина являются важным фактором. Sulfo-NHS-LC-Biotin предлагается в нескольких размерах упаковки и в виде полных наборов для маркировки белков.

Мы производим реагенты биотина, чтобы гарантировать максимально возможную общую целостность продукта, последовательность и производительность для предполагаемых исследовательских приложений.

N -гидроксисульфосукцинимидные (NHS) эфиры биотина являются наиболее популярным типом реагента для биотинилирования. NHS-активированные биотины эффективно реагируют с первичными аминогруппами (-NH2) в щелочных буферах, образуя стабильные амидные связи. Белки (например, антитела) обычно имеют несколько первичных аминов, которые доступны в качестве мишеней для маркировки, включая боковую цепь остатков лизина (K) и N-конец каждого полипептида.

Разновидности биотинаРеагенты NHS-эфира различаются по длине, растворимости, проницаемости для клеток и расщепляемости. Несульфированные NHS-биотины проницаемы для клеток, но должны быть растворены в органическом растворителе, таком как ДМСО или ДМФ. Сульфо-NHS-биотины (и те, что с пегилированными спейсерами) напрямую растворимы в воде, но не проницаемы для мембран. Разновидности, содержащие дисульфидные связи, можно расщепить с помощью восстанавливающих агентов, что позволяет отсоединить биотиновую группу от меченого белка.