Набор для анализа Firefly One-Step Luc Glow Assay Kit компании Thermo Scientific Pierce измеряет активность люциферазы светлячков в культуре клеток млекопитающих, используя один шаг добавления реагента, что делает его идеальным для приложений высокопроизводительного скрининга (HTS).

Характеристики набора для анализа Firefly One-Step Luc Glow Assay Kit:

• Чувствительность — высокочувствительное обнаружение активности люциферазы светлячков
• Без запаха — реагенты не имеют неприятного или токсичного запаха, что устраняет необходимость работать в вытяжном шкафу
• Удобство — одношаговый протокол «смешай и считывай»; дополнительные реагенты не требуются
• Стабильность — увеличенный период полураспада сигнала и стабильность по сравнению с флэш-анализами
• Простота — не требует люминометра с инжекторами
• Удобство автоматизации — подходит для высокопроизводительных анализов

Этот набор для анализа люциферазы светящегося типа предназначен для использования с культивируемыми клетками млекопитающих, которые трансфицированы векторами, экспрессирующими соответствующий репортерный фермент люциферазы светлячков. Несколько функций делают набор особенно подходящим для люминометров без инжекторов и для приложений высокопроизводительного скрининга (HTS). Удобный, одношаговый, гомогенный протокол сводит к минимуму этапы обработки для поддержки использования автоматизации. Просто объедините поставляемый раствор субстрата и буфер анализа, чтобы сделать один рабочий раствор, а затем добавьте его в лунки микропланшета, содержащие трансфицированные, обработанные клетки. Стабильный выходной сигнал (свечение) этой системы обеспечивает гибкость в отношении времени инкубации. При использовании с плазмидами Thermo Scientific Firefly Luc набор обеспечивает высокочувствительную систему анализа биолюминесцентного репортера для обнаружения активности промотора или пути.

Включает:
буфер анализа и раствор субстрата (100X)

Требуется:
люцифераза Firefly и люминометр или другой прибор, способный контролировать люминесценцию, такой как ридеры для микропланшетов Thermo Scientific Luminoskan Ascent и Varioskan Flash.

Применение:
• Исследования промоторов для анализа цис- и транс -действующих регуляторных элементов
• Скрининг лекарственных средств
• Скрининг siRNA и miRNA
• Мультиплексные анализы для изучения нецелевых эффектов
• Анализы локализации белка-репортера
• Анализ путей передачи сигнала

Люцифераза светлячков — это белок массой 62 кДа, вырабатываемый в природе несколькими видами семейства жуков Lampyridae, которое включает роды Photinus и Luciola. Thermo Scientific Red Firefly Luciferase имеет диапазон излучения 560-700 нм (λmax = 613 нм). Биолюминесцентный сигнал от люциферазы светлячка возникает в результате окисления D-люциферина. Световой выход, улавливаемый с помощью люминометра, можно соотнести с количеством произведенного белка люциферазы светлячка и использовать для определения активности промотора, управляющего экспрессией люциферазы светлячка. Биолюминесценция люциферазы светлячка предоставляет исследователям нерадиоактивный анализ для измерения транскрипционной активности регуляторных элементов. Репортерная активность люциферазы светлячка может использоваться для определения активности промотора, для изучения активности восходящего пути в клетке или для определения эффекта активаторов или ингибиторов.