Набор для коиммунопреципитации Thermo Scientific Pierce обеспечивает иммобилизацию ковалентных антител и все компоненты, необходимые для проведения должным образом контролируемого эксперимента co-IP без вмешательства антител в конечный продукт.

Co-IP — это распространенный подход к изучению белок-белковых взаимодействий, при котором антитело иммунопреципитирует антиген (белок-приманка) и коиммунопреципитирует любые взаимодействующие белки (белки-жертвы). Традиционные методы co-IP, использующие белок A или G, приводят к ко-элюированию тяжелых и легких цепей антител, которые могут совместно мигрировать с соответствующими полосами, маскируя важные результаты. Набор Pierce Co-IP решает эту проблему путем ковалентного связывания антител с аминореактивной смолой. Набор включает оптимизированные буферы для связывания и восстановления белков, реагенты для проведения контрольных экспериментов и эффективные спин-колонки и пробирки для сбора, которые сокращают протокол и сводят к минимуму обработку и смешивание.

Особенности набора для коиммунопреципитации:

• Подходит для любого очищенного антитела — проводите эксперименты по ко-ИП с использованием любого очищенного антитела независимо от вида или класса Ig (куриный IgY, человеческий IgE, мышиный IgG1, IgM и т. д.); нет зависимости от аффинного связывания с белком А и белком G
• Отсутствие помех со стороны антител — метод ковалентного присоединения и невосстанавливающая система элюирования позволяют получать чистые продукты ко-ИП без загрязнения антителом ИП
• Многоразовые гранулы антител — иммобилизация ковалентных антител позволяет повторно использовать подготовленную смолу ИП и обеспечивает потенциальную экономию дорогостоящих антител
• Полный набор — все реагенты для иммобилизации антител и множества экспериментов по ИП, включая буферы для связывания и промывки, буфер для элюирования и удобные микроцентрифужные спин-колонки для упрощения и повышения эффективности манипуляций со смолой.
• Включены контрольные бусины — недериватизированные агарозные бусины, предоставленные для использования в качестве отрицательного контроля для неспецифического связывания
• Универсальность — метод co-IP совместим с любым физиологическим (неденатурирующим) буфером образца белка, совместимым со специфическим комплексом антитело-антиген и взаимодействием белка.

Коиммунопреципитация (Co-IP) — популярный метод in-vitroМетод обнаружения взаимодействий белков. Набор Pierce Co-Immunoprecipitation Kit настроен на предоставление основных инструментов для эффективного выполнения экспериментов Co-IP таким образом, чтобы получать чистые продукты IP и co-IP, свободные от проблемных антител IP. Это улучшение традиционной техники co-IP достигается путем замены агарозных гранул Protein A/G на смолу AminoLink Plus, с которой чистые антитела IP могут быть напрямую и навсегда конъюгированы. Мягкий (невосстанавливающий, неденатурирующий) элюирующий буфер позволяет диссоциировать мишени IP, сохраняя иммобилизованные антитела на агарозных гранулах. Результатом является чистый продукт, который можно анализировать с помощью вестерн-блоттинга (или даже секвенировать) без помех со стороны антител.

Помимо устранения загрязнения антителами IP, метод конъюгации антител, являющийся неотъемлемой частью набора Pierce Co-IP Kit, позволяет избежать неспецифических связывающих взаимодействий и выщелачивающего загрязнения, которые могут возникнуть в результате традиционных методов Protein A и Protein G. Хотя метод конъюгации требует, чтобы исходное антитело находилось в буфере без аминов без BSA, желатина или других стабилизаторов запасных белков, тот факт, что он не зависит от белка A или белка G, означает, что для IP можно использовать любой вид или класс антител (например, IgM и куриный IgY). Действительно, любой очищенный белок можно иммобилизовать для использования в аффинной очистке партнеров по связыванию.