Набор для быстрого изотипирования антител Thermo Scientific Pro-Detect Rapid Antibody Isotyping Assay Kit - Mouse - это одноразовый набор с полосками для быстрого и легкого определения класса и подкласса мышиных моноклональных антител. Этот анализ изотипирования антител использует мембранные полоски, покрытые связанными с красителем конъюгированными антителами, которые обеспечивают визуальное цветное считывание изотипа моноклональных антител в течение десяти минут. Набор определяет мышиные IgG1, IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, IgM, а также идентичность легкой цепи (каппа против лямбда легких цепей).

Характеристики набора для быстрого изотипирования антител Pro-Detect:
• Длительный срок хранения — стабилен в течение не менее одного года при температуре 4 °C
• Простой рабочий процесс — разбавьте образец антитела с помощью предоставленного разбавителя и опустите в полоску для бокового тока
• Быстро — в течение 5–10 минут появляется полоса, указывающая на изотип антитела
• Чувствительность — обнаруживает антитела в средах для культивирования тканей или образцах асцитической жидкости вплоть до низких концентраций нг/мл
• Специфичность — анализ не дает перекрестной реакции с сывороткой плода крупного рогатого скота (FBS)
• Надежность — результаты аналогичны результатам стандартных изотипических анализов на основе ИФА

Каждый анализ для быстрого изотипирования антител Pro-Detect выполняется путем простого добавления надлежащим образом разбавленного супернатанта культуры тканей или образца асцитической жидкости мыши в пробирку или лунку микропланшета и опускания в полоску для бокового тока. Конъюгаты золота, встроенные в мембрану полоски, образуют специфические растворимые комплексы класса и подкласса с антителами в образце. Эти комплексы перемещаются по всей длине мембраны и разделяются на антиизотипических и класс-специфических антителах, пропитанных областями мембраны. Результаты отображаются в виде красной полосы над напечатанным описанием класса или подкласса, что указывает на присутствующий изотип антитела.

Определение класса и подкласса моноклонального антитела полезно при планировании наилучшего метода очистки иммуноглобулина. Например, мышиные IgA и IgM лучше всего очищаются по размеру (т. е. гель-исключением) или с использованием иммуноаффинных разделительных колонок. Мышиные IgG2a и IgG2b очищаются с помощью иммобилизованного белка A при pH 7–8, тогда как мышиный IgG1 лучше всего связывается с белком A при pH 8–9. Иммуноглобулин, содержащий легкие цепи каппа, можно очистить с помощью иммобилизованного белка L.

Набор для быстрого изотипирования антител Pro-Detect совместим как с супернатантом культуры тканей, так и с асцитной жидкостью мышей, и более чувствителен, чем обычные анализы с использованием латексных шариков, и намного быстрее, чем изотипические анализы на основе ИФА. Для набора требуется всего 0,5 мкл асцитной жидкости, 2–22 мкл супернатанта клеточной культуры или 1,5 нг очищенного антитела.