Набор для биотинилирования Thermo Scientific EZ-Link NHS-PEG4 содержит EZ-Link NHS-PEG4-Biotin и вспомогательные реагенты, необходимые для 8 реакций мечения белков массой 1–10 мг. EZ-Link NHS-PEG4-Biotin — это пегилированный, водорастворимый реагент для простого и эффективного мечения биотином антител, белков и других макромолекул, содержащих первичные амины.

Особенности EZ-Link NHS-PEG4-Biotin:

• Маркировка белка — биотинилирование антител или других белков для обнаружения или очистки с использованием зондов или смол стрептавидина
• Аминореактивный — реагирует с первичными аминами (-NH2), такими как боковая цепь лизинов (K) или аминоконцы полипептидов
• Пегилированный — спейсерная группа содержит гидрофильную 4-звенную полиэтиленгликолевую (ПЭГ) группу
• Улучшает растворимость — пегилирование придает водорастворимость биотинилированной молекуле, помогая предотвратить агрегацию биотинилированных антител, хранящихся в растворе
• Необратимый — образует постоянные амидные связи; спейсерная группа не может быть расщеплена
• Большая досягаемость — спейсерная группа (общая длина, добавленная к цели) составляет 29 ангстрем; это снижает стерические помехи при связывании с молекулами авидина

NHS-PEG4-Biotin — это длинный (29,0Å), пегилированный, водорастворимый, NHS-эфирный биотинилирующий реагент для маркировки аминов и максимизации растворимости антител и других белков. Группа N -гидроксисукцинимидного эфира (NHS) специфически и эффективно реагирует с лизином и N-концевыми аминогруппами с образованием стабильных амидных связей. Гидрофильный полиэтиленгликолевый (PEG) спейсерный плечо придает водорастворимость, которая передается биотинилированной молекуле, тем самым уменьшая агрегацию меченых белков, хранящихся в растворе. PEG спейсерный плечо также придает реагенту длинную и гибкую связь для минимизации стерических помех при связывании с молекулами авидина.

Мы производим биотиновые реагенты, чтобы гарантировать максимально возможную общую целостность продукта, последовательность и производительность для предполагаемых исследовательских применений.

N -гидроксисульфосукцинимидные (NHS) эфиры биотина являются наиболее популярным типом биотинилирующего реагента. Биотины, активированные NHS, эффективно реагируют с первичными аминогруппами (-NH2) в щелочных буферах, образуя стабильные амидные связи. Белки (например, антитела) обычно имеют несколько первичных аминов, которые доступны в качестве мишеней для маркировки, включая боковую цепь остатков лизина (K) и N-конец каждого полипептида.

Разновидности биотинаРеагенты NHS-эфира различаются по длине, растворимости, проницаемости для клеток и расщепляемости. Несульфированные NHS-биотины проницаемы для клеток, но должны быть растворены в органическом растворителе, таком как ДМСО или ДМФ. Сульфо-NHS-биотины (и те, что с пегилированными спейсерами) напрямую растворимы в воде, но не проницаемы для мембран. Разновидности, содержащие дисульфидные связи, можно расщепить с помощью восстанавливающих агентов, что позволяет отсоединить биотиновую группу от меченого белка.