Химически компетентные E. coli One Shot BL21 Star (DE3) предназначены для приложений, требующих высокого уровня экспрессии нетоксичных рекомбинантных белков из систем экспрессии на основе промотора T7 с низким числом копий, таких как векторы Champion pET. Этот штамм обеспечивает повышенную стабильность мРНК благодаря мутации в гене RNaseE ( rne 131), которая снижает уровни эндогенных РНКаз и деградации мРНК, тем самым увеличивая стабильность транскриптов мРНК и увеличивая выход белка. Штамм BL21 Star имеет более высокую базальную экспрессию гетерологичных генов, чем штаммы BL21 (DE3), из-за повышенной стабильности мРНК. Таким образом, такие штаммы, как BL21-AI, рекомендуются для экспрессии токсичных белков. Химически компетентные клетки One Shot BL21 Star (DE3) предоставляются с эффективностью трансформации >1 x 10 8 КОЕ/мкг плазмидной ДНК.

BL21(DE3) является производным штамма E. coli B, который не содержит протеазу lon и также имеет дефицит протеазы внешней мембраны OmpT. Отсутствие двух ключевых протеаз снижает деградацию гетерологичных белков, экспрессируемых в штамме. Кроме того, несколько других особенностей штамма делают его особенно подходящим для производства белка, а именно быстрый рост в минимальной среде, более низкое производство ацетата при выращивании в средах с высоким содержанием глюкозы и способность достигать высокой плотности клеток. Штамм

BL21 (DE3) E. coli является одним из самых популярных штаммов-хозяев, используемых для производства рекомбинантных белков и адаптированных для исследовательских или промышленных применений. Этот штамм был разработан для переноса лизогена λDE3, который содержит ген РНК-полимеразы T7 под контролем промотора lac UV5. IPTG требуется для индукции экспрессии каскадной системы РНК-полимеразы T7, которая, в свою очередь, транскрибирует целевой ген, регулируемый промотором T7.

One Shot BL21 Star (DE3) Химически компетентные E. coli предлагают:
• Эффективность трансформации >1 x 10 8 КОЕ/мкг плазмидной ДНК
• Дефицит ионной и OmpT-протеазы снижает деградацию рекомбинантного белка
• Оптимизированы для использования с плазмидами на основе промотора T7 с низким числом копий
• Мутация rne 131, которая снижает уровни эндогенных РНКаз и деградации мРНК
• Мутация hsd S, которая обеспечивает эффективную трансформацию неметилированной ДНК
• Быстрый рост в минимальной среде и способность достигать высокой плотности клеток

Простой в использовании формат One Shot
Химически компетентные клетки E. coli BL21 Star (DE3) поставляются в удобном формате One Shot для одной реакции. Формат одноразового использования с одной пробиркой позволяет проводить все этапы протокола трансформации, вплоть до посева, в одной пробирке, тем самым экономя время и предотвращая загрязнение.