Наборы LIVE/DEAD Bac Light Bacterial Viability Kits — это удобные и простые в использовании наборы для мониторинга жизнеспособности бактериальных популяций на основе целостности мембраны клетки. Эти наборы обеспечивают двухцветный флуоресцентный анализ жизнеспособности бактерий для разнообразного ряда родов бактерий. Клетки с поврежденной мембраной, которые мертвы или умирают, будут окрашиваться в красный цвет с помощью йодида пропидия, тогда как клетки с неповрежденной мембраной будут окрашиваться в зеленый цвет с помощью SYTO™ 9. Эти наборы позволяют исследователям различать живые и мертвые бактерии в течение нескольких минут, даже в смешанных популяциях с различными типами бактерий с помощью флуоресцентной визуализации, проточной цитометрии и микропланшетных анализов.

Наборы для определения жизнеспособности бактерий LIVE/DEAD Bac Light используют смеси нашего зеленого флуоресцентного красителя нуклеиновых кислот SYTO™ 9 и красного флуоресцентного красителя нуклеиновых кислот, пропидия йодида. Эти красители различаются как по своим спектральным характеристикам, так и по своей способности проникать в здоровые бактериальные клетки. При использовании отдельно краситель SYTO 9 обычно маркирует все бактерии в популяции — как с неповрежденными мембранами, так и с поврежденными мембранами. Напротив, пропидий йодид проникает только в бактерии с поврежденными мембранами, вызывая снижение флуоресценции красителя SYTO 9, когда присутствуют оба красителя. Наборы для определения жизнеспособности бактерий

LIVE/DEAD Bac Light были тщательно протестированы с различными организмами и в нескольких условиях. Наборы идеально подходят для флуоресцентной микроскопии, поскольку живые (зеленый флуоресцентный) и мертвые (красный флуоресцентный) клетки можно просматривать отдельно. Они также подходят для количественного анализа с помощью флуорометра, флуоресцентного микропланшетного ридера, проточного цитометра или других приборов.

Традиционные методы оценки жизнеспособности бактерий основаны на метаболических характеристиках или целостности мембраны. Однако из-за различий в морфологии, цитологии и физиологии среди многих родов бактерий разработка универсально применимого анализа жизнеспособности с прямым подсчетом была сложной задачей. Наборы для определения жизнеспособности бактерий LIVE/DEAD Bac Light, основанные на целостности мембраны, позволяют исследователям легко, надежно и количественно различать живые и мертвые бактерии за считанные минуты, даже в смешанной популяции с различными типами бактерий.

Набор LIVE/DEAD Bac Light Bacterial Viability Kit доступен в трех различных форматах: Набор

LIVE/DEAD Bac Light Bacterial Viability Kit для микроскопии (Кат. № L7007)
Набор LIVE/DEAD Bac Light Bacterial Viability Kit для микроскопии включает два различных предварительно смешанных раствора SYTO 9 и пропидия йодида (PI) в 300 мкл ДМСО. Флуоресцентные красители смешиваются в разных пропорциях в каждом из них: Компонент A – 1,67 мМ SYTO 9 и 1,67 мМ PI, Компонент B – 1,67 мМ STYO 9 и 18,3 мМ PI. Этот набор доступен для клиентов, которые уже разработали протоколы с использованием предварительно смешанной формулы красителя. Набор для определения жизнеспособности бактерий

LIVE/DEAD
Bac Light, для микроскопии и количественных анализов (Кат. № L7012) Набор для определения жизнеспособности бактерий LIVE/DEAD Bac Light , для микроскопии и количественных анализов включает два отдельных раствора красителей SYTO 9 (3,34 мМ) и пропидий йодида (20 мМ) в 300 мкл ДМСО. Отдельные компоненты окрашивания обеспечивают гибкость для оптимизации и облегчают калибровку бактериальной флуоресценции для количественных процедур.

LIVE/DEAD BacНабор для определения жизнеспособности бактерий Light (кат. № L13152)
Для дополнительного удобства набор для определения жизнеспособности бактерий LIVE/DEAD Bac Light содержит 10 пар предварительно измеренных отдельных красителей SYTO 9 и пропидий йодида в герметичных полиэтиленовых пипетках для переноса. В дополнение к удобной упаковке в герметичных пипетках флуоресцентные красители поставляются сухими, без ДМСО или других растворителей. Эта формула не требует охлаждения и остается стабильной при температурах ≤–20 °C после восстановления.

Все три набора поставляются с 10 мл монтажного масла Bac Light для бактерий, иммобилизованных на мембранах. Показатель преломления при 25 °C составляет 1,517 ± 0,003.

Любой физиологический буфер с pH от 7,0 до 8,0, включая PBS, можно использовать для разбавления красителей SYTO для окрашивающего раствора.

При рекомендуемых разведениях реагентов и объемах наборы L7007 и L7012 содержат достаточно материала для проведения ≥1000 отдельных тестов в 96-луночных планшетах, гораздо большего количества тестов с помощью флуоресцентной микроскопии или ~200 тестов с помощью проточной цитометрии.

В наборе L13152 каждая пара аппликаторов содержит достаточно красителя для проведения 50 отдельных тестов в 96-луночном планшете, ~1000 анализов с помощью флуоресцентной микроскопии или 10 тестов с помощью проточной цитометрии.

Наборы LIVE/DEAD Bac Light Bacterial Viability Kits были протестированы на следующих видах бактерий: Bacillus cereus, B. subtilis, Clostridium perfringens, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Micrococcus luteus, Mycobacterium phlei, Pseudomonas aeruginosa, P. syringae, Salmonella oranienburg, Serratia marcescens, Shigella sonnei, Staphylococcus aureus и Streptococcus pyogenes. Все эти типы бактерий показали хорошую корреляцию между результатами, полученными с помощью наборов LIVE/DEAD Bac Light Bacterial Viability Kits, и результатами, полученными с помощью стандартных чашечных подсчетов.

Эти тесты проводились на логарифмически растущих культурах организмов. Кроме того, мы получили положительные отзывы от исследователей, которые использовали эти наборы с: Agrobacterium tumefaciens, Edwardsiella ictaluri, Eurioplasma eurilytica, Lactobacillus sp., Mycoplasma hominus, Propionibacterium sp., Proteus mirabilis и Zymomonas sp.