Особенности и преимущества очистки продукта ПЦР ExoSAP-IT™
• Сохраняет образцы ПЦР — 100% восстановление как коротких, так и длинных продуктов ПЦР
• Очистка ПЦР в одну пробирку/один этап — добавляйте реагент ExoSAP-IT непосредственно в продукт ПЦР
• Устраняет необходимость в спин-колонках — сокращает время и расходы при увеличении выхода
• Удаляет загрязняющие праймеры и dNTP — не мешает дальнейшим приложениям
• Масштабируемость — экономично для высокопроизводительной очистки
• Простая обработка — подходит для робототехники; заменяет гранулы, фильтры и планшеты
• Создает меньше отходов, чем колонки

Реагент ExoSAP-IT предназначен для простой и быстрой очистки ПЦР для последующих приложений, таких как секвенирование ДНК или анализ полиморфизма одиночных нуклеотидов (SNP). После завершения амплификации ПЦР любые неизрасходованные dNTP и праймеры, оставшиеся в смеси продуктов ПЦР, будут мешать этим методам. ExoSAP-IT удаляет эти загрязняющие вещества.

ExoSAP-IT добавляется непосредственно в продукт ПЦР и инкубируется при температуре 37 °C в течение 15 минут (рис. 1). После обработки ПЦР ExoSAP-IT инактивируется простым нагреванием до 80 °C в течение 15 минут.

Одношаговая очистка ПЦР ExoSAP-IT использует два гидролитических фермента, экзонуклеазу I и щелочную фосфатазу креветок (SAP), вместе в специально разработанном буфере для удаления нежелательных dNTP и праймеров из продуктов ПЦР. Экзонуклеаза I удаляет остаточные одноцепочечные праймеры и любую постороннюю одноцепочечную ДНК, полученную в ходе ПЦР. SAP удаляет оставшиеся dNTP из смеси ПЦР.

Протокол быстрой очистки продукта ПЦР
ExoSAP-IT требует только одного этапа пипетирования и двух инкубаций. Просто добавьте ExoSAP-IT в продукт ПЦР, и в течение 30 минут можно будет выполнить секвенирование или анализ SNP.

Простота: одношаговый
Метод разработан так, чтобы требовать минимум времени «на руках». Ферментативное удаление избыточных праймеров и невключенных нуклеотидов происходит за один простой шаг с использованием реагента ExoSAP-IT в одной пробирке или лунке микротитратора. Требуются только простые переносы пипеткой, поэтому можно обрабатывать много образцов одновременно, как вручную, так и с помощью робототехники.

Отсутствие потери образца
Использование реагента ExoSAP-IT устраняет все очистки геля или колонки, осаждения, фильтрации, гранул и/или магнитного разделения. С ExoSAP-IT обеспечивается 100% извлечение как коротких, так и длинных продуктов ПЦР (рис. 2).

Достижение высокого качества данных из продуктов ПЦР
Реагент ExoSAP-IT может использоваться в качестве эффективного метода очистки перед флуоресцентным или радиоактивным секвенированием ДНК, анализом SNP или любым другим применением, требующим продукта ПЦР, свободного от избыточных нуклеотидов и праймеров.