Наборы Zero Blunt™ TOPO™ PCR Cloning Kits для секвенирования обеспечивают высокоэффективную 5-минутную одношаговую стратегию клонирования («TOPO™ Cloning») для прямой вставки продуктов ПЦР с тупыми концами, амплифицированных корректирующей полимеразой, в плазмидный вектор для секвенирования. Каждый набор использует вектор pCR™4Blunt-TOPO™ со специально разработанными участками праймера секвенирования, которые возвращают больше последовательности вставки и меньше последовательности вектора из каждой реакции. Эти наборы включают все необходимое для клонирования и выбора рекомбинантных векторов, содержащих выбранный вами фрагмент ПЦР.

Get More Sequence — позволяет использовать больше вставок и меньше векторных последовательностей при использовании стандартных праймеров для секвенирования

• Быстро и просто — переходите от ПЦР к клонам всего за 3 шага и всего за 5 минут практического времени
• Эффективно — достигайте до 95% клонов с правильной вставкой
• Доказано — надежная работа на протяжении более десятилетия с более чем 4000 цитирований

Наборы для клонирования Zero Blunt™ TOPO™ для секвенирования Обзор набора
• ВЕКТОР: Вектор pCR™4Blunt-TOPO™ — оптимизированный вектор клонирования для улучшения результатов секвенирования
• МЕТОД КЛОНИРОВАНИЯ: Клонирование TOPO™ — 5-минутное лигирование на основе топоизомеразы I продуктов ПЦР, амплифицированных корректирующей полимеразой, с тупыми концами к вектору
• КОМПЕТЕНТНЫЕ КЛЕТКИ: Различные варианты — выбирайте из наборов с общим, высокоэффективным, бактериофагом T1-устойчивые или быстрорастущие компетентные клетки

Вектор pCR™4Blunt-TOPO™ — оптимизирован для секвенирования
Мы удалили большую часть множественного сайта клонирования из вектора pCR™4Blunt-TOPO™, чтобы сократить расстояние между сайтами праймеров секвенирования и сайтом вставки до всего лишь 33 п.н. Это означает, что реакции секвенирования дают меньше векторной последовательности и больше последовательности вставки. Вектор pCR™4Blunt TOPO™ имеет сайты для 4 общих праймеров секвенирования: M13 прямой, M13 обратный, T7 и T3. Наборы включают аликвоту каждого.

Выбор и манипуляция клоном pCR™4Blunt-TOPO™
Вектор pCR™4Blunt-TOPO™ содержит маркеры устойчивости как к ампициллину, так и к канамицину, а также слияние генов LacZα-ccdB для положительного отбора. Минимизированный сайт множественного клонирования вектора по-прежнему включает фланкирующие сайты EcoRI для упрощенного вырезания клонированных продуктов ПЦР и уникальный сайт Sse8387I для генерации вложенных делеций перед секвенированием. Промоторы T7 и T3 также присутствуют для транскрипции in vitro .

Упрощенное клонирование на основе TOPO™
Используя технологию клонирования TOPO™, нет необходимости в праймерах ПЦР, содержащих определенные последовательности, процедурах после ПЦР, подготовке векторов или других трудоемких этапах манипуляции ДНК. Просто добавьте вашу реакцию ПЦР прямо в предоставленный вектор, заряженный топоизомеразой, инкубируйте 5 минут и трансформируйте предоставленные компетентные клетки E. coli .

Эффективное клонирование
Благодаря тому, что до 95% клонов несут желаемую вставку, вы можете скринировать меньше клонов, что поможет вам сэкономить время и деньги. Вектор pCR™4Blunt-TOPO™, используемый в этом наборе, не имеет нависающих концов для эффективного лигирования продуктов ПЦР, созданных корректирующими термостабильными полимеразами, которые оставляют продукты ПЦР с тупыми концами.

Стандарт в клонировании
Когда дело доходит до клонирования, технология клонирования TOPO™ уже более десяти лет является надежным партнером для тысяч ученых. Быстрое, простое в использовании и эффективное клонирование TOPO™ применяется ко многим различным векторам для широкого спектра применений.

Наборы для клонирования ПЦР Zero Blunt™ TOPO™ для секвенирования Варианты наборов
Набор для клонирования ПЦР Zero Blunt™ TOPO™ для секвенирования можно приобрести с различными компетентными клетками, которые обеспечивают различные преимущества в зависимости от ваших потребностей:

• Общее клонирование: TOP10 (кат. № K2875-J10, K2875-20, K2875-40)
• Высокоэффективное клонирование: клетки TOP10 Electrocomp™ (кат. № K2880-20, K2880-40)
• Общее клонирование, устойчивость к бактериофагу T1: DH5α-T1R (кат. № K2895-20)
• Быстрый рост: Mach1™-T1R Химически компетентные E. Coli (кат. № K2835-20)

Продукты TOPO™ предназначены только для исследовательских целей. Не предназначено для использования в терапевтических или диагностических целях на животных или людях.