Экспрессия бакуловируса Bac-to-Bac™ — эффективный метод получения бакуловируса для экспрессии белка на высоком уровне в клетках насекомых. Он основан на создании рекомбинантного вируса путем сайт-специфической транспозиции в E. coli, а не гомологичной рекомбинации в клетках насекомых. Новое: векторы pFastBacTOPO™!


Надежная и быстрая экспрессия белка
Система экспрессии бакуловируса Bac-to-Bac™ быстрее и проще, чем традиционная экспрессия бакуловируса, и она поддерживает высокий уровень экспрессии белка. Bac-to-Bac™ основан на создании рекомбинантного бакуловируса путем сайт-специфической транспозиции в E. coli, а не гомологичной рекомбинации в клетках насекомых. Система экспрессии бакуловируса Bac-to-Bac™ высоко ценится в академической литературе. Примерно 100 ссылок ежегодно с 2000 года!

Традиционные системы бакуловирусов требуют очистки и амплификации исходного вирусного супернатанта с низким титром. Для этого требуется трудоемкий анализ бляшек. Однако вектор pFastBac™ от Bac-to-Bac™ рекомбинирует с родительской бакмидой в компетентных клетках DH10Bac™ E. coli, образуя экспрессионную бакмиду. Трансфицируйте бакмиду в клетки насекомых для быстрого получения высокого титра чистых рекомбинантных частиц бакуловируса при первой же трансфекции. Вы сэкономите недели драгоценного времени. Соберите чистый запас бакуловируса P2 на 10-й день без необходимости проведения утомительного анализа бляшек (см. рисунок 1)

Высокая экспрессия, простой скрининг
pFastBac™ использует сильный промотор полиэдрина для создания высоких уровней экспрессии в различных линиях клеток насекомых, таких как клетки Sf9, Sf21 и High Five™.

Новые дополнения:
Векторы pFastBac от Bac-to-Bac™ теперь доступны также как векторы pFastBacTOPO™. Векторы pFastBacTOPO™ являются векторами Blunt™ TOPO™ и поставляются с Mach1™-T1R E. coli для легкого клонирования и размножения pFastBac⁄GOI. Новые векторы позволяют вам:

• Амплифицировать интересующий вас ген (GOI) с помощью фермента ПЦР высочайшей точности, такого как Accuprime™ Pfx SuperMix.

• TOPO™ клонирует продукт ПЦР с тупым концом в новый вектор всего за 5 минут!

• Визуализируйте колонии через 8 часов после посева на селективные планшеты с ампициллином, поскольку клетки Mach1™-T1R E. coli имеют более быстрое время удвоения по сравнению с другими стандартными штаммами клонирования.

• С набором для клонирования или экспрессии Bac-to-Bac™ C-His TOPO™ вы можете производить белок слияния His C-конца с сайтом расщепления TEV для очистки никель-хелатирующими смолами (система очистки ProBond™ компании Invitrogen) и генерировать нативный белок с помощью популярной протеазы AcTEV™ компании Invitrogen. Это единственный вектор Invitrogen, содержащий сайт расщепления TEV C-конца!

Новые векторы объединяют технологию клонирования TOPO™ с высоко оцененными функциями экспрессии бакуловируса Bac-to-Bac™, что обеспечивает простое клонирование и экспрессию белка высокого уровня.
Векторы pFastBacTOPO™ предлагаются в виде наборов для клонирования и экспрессии.