Описание: Моноклональное антитело 2H7 реагирует с человеческим CD20, трансмембранным белком 33-36 кДа. CD20 экспрессируется развивающимися В-клетками, а также зрелыми В-клетками, но не плазматическими клетками. CD20 был обнаружен на низком уровне в небольшой подгруппе зрелых Т-клеток. Предполагается, что CD20 играет роль в активации В-клеток.

Сообщенные приложения: Это антитело 2H7 было сообщено для использования в проточном цитометрическом анализе.

Протестированные приложения: Это антитело 2H7 было предварительно титровано и протестировано с помощью проточного цитометрического анализа нормальных клеток периферической крови человека. Его можно использовать в концентрации 5 мкл (0,25 мкг) на тест. Тест определяется как количество (мкг) антитела, которое окрасит образец клеток в конечном объеме 100 мкл. Количество клеток должно быть определено эмпирически, но может варьироваться от 10^5 до 10^8 клеток/тест.

APC-eFluor 780 излучает на длине волны 780 нм и возбуждается красным лазером (633 нм). Убедитесь, что ваш прибор способен обнаружить этот флуорохром.

Чувствительность к свету: этот тандем чувствителен к фотоиндуцированному окислению. Пожалуйста, защищайте этот флакон и окрашенные образцы от света.

Фиксация: образцы можно хранить в буфере фиксации IC ( продукт № 00-8222 ) (100 мкл образца клеток + 100 мкл буфера фиксации IC) или в одношаговом растворе для фиксации/лиза ( продукт № 00-5333 ) до 3 дней в темноте при температуре 4 °C с минимальным влиянием на яркость и эффективность/компенсацию FRET. Можно сделать некоторые обобщения относительно производительности флуорофора после фиксации, но производительность клона следует определять эмпирически.

Возбуждение: 633-647 нм; Эмиссия: 780 нм; Лазер: красный лазер.

Фильтрация: 0,2 мкм, фильтрация после производства.

Целевая информация
CD20 — это негликозилированный поверхностный фосфопротеин, молекулярная масса которого составляет 33–37 кДа в зависимости от степени фосфорилирования. CD20 экспрессируется на зрелых и наиболее злокачественных В-клетках, в субпопуляции Т-лимфоцитов и фолликулярных дендритных клеток. Экспрессия CD20 на В-клетках синхронна с экспрессией поверхностного IgM и регулирует трансмембранную кальциевую проводимость, прогрессирование клеточного цикла и пролиферацию В-клеток. CD20 также связан с липидными плотами, но интенсивность этой ассоциации зависит от внеклеточного запуска, использующего конформационные изменения CD20 и/или агрегацию BCR (рецептор антигена В-клеток). После лигирования рецептора BCR и CD20 колокализуются, а затем быстро диссоциируют перед эндоцитозом BCR, тогда как CD20 остается на поверхности клетки. CD20 служит полезной мишенью для терапевтического истощения В-клеток, опосредованного антителами, поскольку он экспрессируется на высоком уровне в большинстве злокачественных опухолей В-клеток, но не становится интернализированным или не высвобождается из плазматической мембраны после лечения моноклональными антителами. Заболевания, связанные с дисфункцией CD20, включают общую вариабельную иммунную недостаточность, связанную с Ms4a1.