Описание: антитело FJK-16s реагирует с Foxp3 мыши, крысы, собаки, свиньи, быка и кошки, также известным как FORKHEAD BOX P3, SCURFIN и JM2; перекрестная реактивность этого антитела с другими белками не была определена. Foxp3, белок 49-55 кДа, является членом семейства транскрипционных регуляторов forkhead/winged-helix и был идентифицирован как ген, дефектный у мышей «scurfy» (sf). Конститутивная высокая экспрессия мРНК foxP3 была показана в регуляторных Т-клетках CD4+CD25+ (клетки Treg), а эктопическая экспрессия foxp3 в клетках CD4+CD25- придает фенотип Treg этим клеткам.

Иммуноблоттинг с антителом FJK-16s картировал эпитоп с аминокислотами 75-125 белка Foxp3 мыши. Было показано, что у человека эта область альтернативно сплайсирована на уровне мРНК. Как альтернативно сплайсированная, так и не сплайсированная изоформы присутствуют в подгруппе лимфоцитов CD4+CD25+. Предварительные эксперименты ОТ-ПЦР не выявили эту альтернативно сплайсированную изоформу в спленоцитах мышей, что предполагает различную регуляцию генов у мышей и людей.

Обратите внимание, что FJK-16s оптимизирован для использования с набором для окрашивания Foxp3/транскрипционного фактора буфера ( продукт № 00-5523-00 ). Использование других буферов фиксации и окрашивания не рекомендуется.

Сообщается о применении: Это антитело FJK-16s было сообщено для использования во внутриклеточном проточном цитометрическом анализе. Для оптимального окрашивания с помощью FJK-16s настоятельно рекомендуется использовать набор для окрашивания Anti-Mouse/Rat Foxp3 FITC ( продукт № 71-5775-40 ). FJK-16s также был зарегистрирован для использования в иммуногистохимическом окрашивании замороженных срезов тканей.

Протестированные приложения: Это антитело FJK-16s было протестировано с помощью внутриклеточного проточного цитометрического анализа спленоцитов мыши с использованием набора для окрашивания Anti-Mouse Foxp3 FITC ( номер продукта 71-5775-40 ) и протокола. Пожалуйста, ознакомьтесь с протоколом внутриклеточного окрашивания на веб-странице Best Protocol - Протокол B: Одношаговый протокол для внутриклеточных (ядерных) белков. Это антитело можно использовать в концентрации менее или равной 1 мкг на тест. Тест определяется как количество (мкг) антитела, которое окрасит образец клеток в конечном объеме 100 мкл. Количество клеток должно быть определено эмпирически, но может варьироваться от 10^5 до 10^8 клеток/тест. Рекомендуется тщательно титровать антитело для оптимальной производительности в интересующем анализе.

Возбуждение: 488 нм; Эмиссия: 520 нм; Лазер: Синий лазер.

Фильтрация: 0,2 мкм, отфильтровано после производства.

Целевая информация
FOXP3 (белок Forkhead box 3) является членом семейства транскрипционных регуляторов forkhead/winged-helix, высококонсервативного у млекопитающих и необходимого для нормального иммунного гомеостаза. FOXP3 состоит из 381 аминокислоты, стабильно и постоянно экспрессируется на высоком уровне в CD25 + CD4 положительных регуляторных Т-клетках, на низком уровне в CD4-положительных/CD25-отрицательных клетках и отсутствует в CD4-отрицательных/CD8-положительных Т-клетках. FOXP3 может быть главным регуляторным геном и более специфичным маркером регуляторных Т-клеток. Дефекты в гене, кодирующем белок FOXP3, вызывают фенотип шелушения у мышей. У людей дефекты FOXP3 играют роль в синдроме IPEX (иммунная дисфункция, полиэндокринопатия, энтеропатия, Х-сцепленный синдром), также известном как синдром Х-сцепленной аутоиммунитета-аллергической дисрегуляции (XLAAD). Были идентифицированы варианты транскрипта FOXP3, кодирующие различные изоформы. В клетках рака груди и толстой кишки человека экспрессия FOXP3 регулируется p53 в ответ на повреждение ДНК.