Обратная транскриптаза (RT) Thermo Scientific Maxima H Minus была разработана в ходе эволюции M-MuLV RT in vitro . Фермент обладает РНК-зависимой и ДНК-зависимой полимеразной активностью, но лишен активности РНКазы H из-за мутации в домене РНКазы H M-MuLV RT. Разработанный фермент отличается значительно улучшенной термостабильностью, в 50 раз более высокой процессивностью, надежностью и увеличенной скоростью синтеза по сравнению с диким типом M-MuLV RT.

Устраненная активность РНКазы H позволяет ферменту производить очень длинные транскрипты РНК длиной до 20 кб. Благодаря своей высокой термостабильности фермент сохраняет полную активность в течение всей реакции обратной транскрипции и генерирует высокие выходы кДНК. Температуру реакции можно повысить до 65 °C для эффективной транскрипции участков РНК с высокой вторичной структурой или для улучшения специфичности с использованием ген-специфичных праймеров. Чрезвычайно высокая процессивность фермента Maxima H Minus приводит к повышенной устойчивости к распространенным ингибиторам реакции, таким как гуанидин, формамид и этанол.

Характеристики обратной транскриптазы Maxima H Minus включают:
• Термостабильность — активность 90% после инкубации при 50°C в течение 60 минут в реакционной смеси
• Активность до 65°C
• Высокий выход полноразмерной кДНК до 20 кб
• Высокая чувствительность — воспроизводимый синтез кДНК из широкого диапазона начальных количеств общей РНК (от 1 пг до 5 мкг)
• Эффективность — полный синтез кДНК за 15–30 минут
• Повышенная устойчивость к распространенным ингибиторам реакции
• Включает модифицированные нуклеотиды

Применения
• Синтез первой цепи кДНК для ОТ-ПЦР и ОТ-кПЦР
• Обратная транскрипция при повышенных температурах для снижения эффектов вторичной структуры
• Синтез кДНК для клонирования и экспрессии
• Генерация меченых зондов кДНК для микрочипов
• Анализ РНК путем удлинения праймера