Thermo Scientific Maxima H Minus First Strand cDNA Synthesis Kit, доступный с dsDNase или без нее, представляет собой полную систему для высокоэффективного синтеза первой цепи cDNA. В наборе используется Maxima H Minus Reverse Transcriptase (RT), которая является передовым ферментом, полученным путем эволюции MMLV RT in vitro. Фермент отличается самой высокой термостабильностью среди производных MMLV RT и не имеет активности РНКазы H.
Этот набор позволяет синтезировать длинные кДНК до 20 кб при повышенных температурах (до 65°C), превосходя возможности других систем производить полноразмерную кДНК. Благодаря повышенной скорости синтеза реакция может быть завершена за 30 минут.

Для обратной транскрипции набор использует обратную транскриптазу (RT) Maxima H Minus, которая является усовершенствованным ферментом, полученным путем эволюции MMLV RT in vitro

. Набор для синтеза кДНК Maxima H Minus First Strand с dsDNase обеспечивает значительно упрощенный рабочий процесс, который объединяет устранение геномной ДНК и синтез кДНК в одной пробирке. Набор содержит новую двухцепочечную специфичную ДНКазу (dsDNase), разработанную для удаления загрязняющей геномной ДНК из препаратов РНК за две минуты без ущерба для качества или количества РНК. Высокоспецифичная активность dsDNase по отношению к двухцепочечной ДНК гарантирует, что одноцепочечная ДНК (например, кДНК и праймеры) не будет расщеплена, а обработанная dsDNase РНК может быть напрямую добавлена ​​в обратную транскрипцию.

Особенности набора для синтеза первой цепи кДНК Maxima H Minus включают:
• Повышенные температуры реакции — первая цепь кДНК может быть синтезирована в диапазоне температур 42–65 °C
• Высокий выход полноразмерной первой цепи кДНК — с матрицами РНК до 20 кб
• Гибкое праймирование — олиго(dT) 18 , случайные гексамерные или геноспецифичные праймеры
• Интегрированный этап удаления геномной ДНК с набором dsDNase

Применение
• Синтез первой цепи кДНК для ОТ-ПЦР
• Создание библиотек кДНК
• Генерация зондов для гибридизации
• Синтез антисмысловой РНК

Содержание
• Смесь ферментов Maxima H Minus
• Праймеры олиго(dT) 18 и случайные гексамерные
• 5X буфер обратной транскрипции
• Смесь dNTP
• Вода без нуклеазы

Набор для синтеза первой цепи с dsDNase также содержит
• dsDNase и 10X dsDNase Буфер

Дополнительная информация о компонентах реакции
• Смесь ферментов Maxima H Minus содержит обратную транскриптазу Maxima H Minus и ингибитор РНКазы RiboLock. Ингибитор РНКазы RiboLock эффективно защищает шаблоны РНК от деградации РНКазами A, B и C при температурах до 55°C.
• В комплект входят праймеры Oligo(dT) 18 и случайные гексамерные праймеры. Случайные гексамерные праймеры связываются неспецифически и используются для синтеза кДНК из всех РНК в общей популяции РНК. Праймер oligo(dT)18 селективно отжигается с 3'-концом поли(А) РНК, синтезируя кДНК только из поли(А)-хвоста мРНК. Ген-специфичные праймеры также могут использоваться с комплектом для инициирования синтеза из указанной последовательности.
• 10 мМ dNTP Mix представляет собой предварительно смешанный водный раствор dATP, dTTP, dCTP и dGTP.
• Для настройки реакции и разбавления образца ДНК предоставляется вода без нуклеазы. Отсутствие эндо-, экзодезоксирибонуклеаз, рибонуклеаз и фосфатаз подтверждено соответствующими испытаниями качества.