Набор для синтеза кДНК Thermo Scientific Maxima First Strand для ОТ-ПЦР в режиме реального времени, доступный с dsDNase или без нее, представляет собой удобную систему, оптимизированную для синтеза кДНК в двухэтапных количественных ОТ-ПЦР (ОТ-ПЦР). Он обеспечивает значительно упрощенный рабочий процесс, который объединяет устранение геномной ДНК и синтез кДНК в однопробирочной процедуре. Эти наборы для синтеза кДНК используют обратную транскриптазу (ОТ) Maxima, усовершенствованный фермент, полученный в результате эволюции M-MuLV ОТ in vitro. Фермент отличается высокой термостабильностью, надежностью и повышенной скоростью синтеза кДНК по сравнению с диким типом M-MuLV ОТ.

Набор для синтеза ДНК первой цепи Maxima для ОТ-ПЦР в режиме реального времени (RT-qPCR) позволяет производить воспроизводимый синтез ДНК из широкого диапазона количеств общей РНК (от 1 пг до 5 мкг) при повышенных температурах (42–65 °C). Реакция синтеза может быть завершена за 15–30 минут. Компоненты набора для синтеза ДНК первой цепи Maxima для ОТ-ПЦР в режиме реального времени (RT-qPCR) предварительно смешаны для экономии времени и снижения вероятности ошибок пипетирования.

Набор для синтеза первой цепи ДНК Maxima для ОТ-ПЦР с dsDNase также содержит новую двухцепочечную специфическую ДНКазу, разработанную для удаления загрязняющей геномной ДНК из РНК-препаратов за две минуты без ущерба для качества или количества РНК. Высокоспецифичная активность по отношению к двухцепочечной ДНК гарантирует, что одноцепочечная ДНК (например, кДНК и праймеры) не расщепляется, а обработанная dsDNase РНК может быть напрямую добавлена ​​в обратную транскрипцию.

Возможности набора Maxima First Strand cDNA Synthesis Kit для ОТ-ПЦР включают:

Высокий выход полноразмерной кДНК до 20 кб
Эффективный синтез кДНК в широком диапазоне температур (42–65°C)
Повышенная скорость синтеза — полный синтез кДНК за 15–30 минут
Высокая чувствительность и специфичность
Интегрированный этап удаления геномной ДНК с помощью набора dsDNase
Набор для синтеза первой цепи ДНК Maxima с двухцепочечной ДНКазой содержит:

Смесь ферментов Maxima
5X Реакционная Смесь
вода без нуклеазы
В комплект с dsDNase также входит

dsДНКаза
10X буфер dsДНКазы
Приложения

2-этапная ОТ-ПЦР
2-этапная ОТ-ПЦР
Дополнительная информация о компонентах реакции

Maxima Enzyme Mix содержит Maxima Reverse Transcriptase и RiboLock RNase Inhibitor. Рекомбинантный RiboLock RNase Inhibitor эффективно защищает РНК-шаблоны от деградации РНКазами A, B и C при температурах до 55°C.

5X Reaction Mix содержит остальные компоненты реакции: реакционный буфер, dNTP, олиго(dT)18 и случайные гексамерные праймеры. Вода без нуклеазы предоставляется для настройки реакции и разбавления образца РНК.

Отсутствие эндо- и экзодезоксирибонуклеаз, рибонуклеаз и фосфатаз подтверждено соответствующими испытаниями качества.