Набор для очистки BigDye XTerminator™ — это быстрый и простой метод очистки для реакций секвенирования ДНК, который удаляет невключенные терминаторы BigDye™ и соли. Больше никаких пятен красителя! Очистка выполняется менее чем за 40 минут и требует менее 10 минут труда.

• Исключите перенос жидкости — используйте одну пластину.
• Получите полное удаление пятен красителя.
• Стабилизируйте образцы перед анализом.
• Улучшите рабочий процесс секвенирования.
• Выполняйте ручные или автоматизированные протоколы.
• Получайте быстрые, надежные и воспроизводимые результаты.

Простой процесс очистки
Традиционные методы очистки, такие как осаждение этанолом, требуют добавления нескольких реагентов вместе с этапами декантации и центрифугирования. Набор для очистки BigDye XTerminator™ требует добавления всего двух реагентов, которые можно добавлять последовательно или предварительно смешивать:

• Раствор XTerminator™ — удаляет невключенные терминаторы красителя и свободные соли из реакции после секвенирования.
• SAM™ Solution – повышает производительность XTerminator™ Solution и стабилизирует реакции после очистки.

Протокол очень прост (см. рисунок 1):
1. Выполните циклическое секвенирование с терминаторами BigDye™.
2. После циклического секвенирования кратковременно центрифугируйте реакционную пластину, а затем пипеткой внесите нужный объем SAM™ Solution в каждую лунку пластины.
3. Пипеткой внесите нужный объем XTerminator™ Solution в каждую лунку:
4. Кратковременно встряхните контейнер с раствором XTerminator™ Solution.
5. Используя наконечник пипетки с широким отверстием (рекомендуются наконечники с широким отверстием), внесите нужный объем жидкости в каждую лунку пластины.
6. Запечатайте пластину с помощью термосварки или прозрачной клейкой пленки (P/N 4306311). Вортексируйте в течение 30 минут (рекомендуются 96-луночные и 384-луночные микропланшетные вортексы), затем центрифугируйте реакционную пластину в течение короткого времени.
7. Поместите реакционную пластину в анализатор ДНК Applied Biosystems. Выберите модуль запуска и планшет запуска.

Превосходное восстановление длинных фрагментов
Вы не пожертвуете длиной последовательности, если будете использовать набор для очистки BigDye XTerminator™. На рисунке 2 показаны данные из отдела ДНК-технологий Института биотехнологии растений (NRC-PBI) Саскатун, Канада. Считывание основания Q20 = 1044 п.н.

Улучшенное восстановление коротких фрагментов
Используйте набор для очистки BigDye XTerminator™ для получения более качественных данных. На рисунке 3 показано сравнение набора для очистки BigDye XTerminator™ и очистки на основе осаждения этанолом, выполненной в отделе ДНК-технологий Института биотехнологии растений (NRC-PBI) Саскатун, Канада. Набор для очистки BigDye XTerminator™ обеспечивает превосходное восстановление коротких фрагментов. Очистка этанолом дает данные о последовательности, искаженные пятнами красителя.

Повышенная стабильность
Герметичные реакционные планшеты стабильны в течение 48 часов при комнатной температуре или 10 дней при 4 °C. Вы можете повторно запустить тот же образец в случае сбоя питания, неисправности компьютера и т. д. без необходимости повторять эксперимент. Это увеличивает вашу гибкость при загрузке реакционной пластины в прибор CE.

Доступные модули запуска
Applied Biosystems предоставляет загружаемые модули запуска для использования с набором очистки BigDye XTerminator™ и программным обеспечением для сбора данных. Эти модули предназначены для анализаторов 3100, 3100-Avant (с Data Collection v2.0 или выше), 3130/3130xl и 3730/3730xl. Программные модули для набора очистки BigDye XTerminator™ совместимы с операционными системами Windows™ 2000 и Windows™ XP и доступны на нашей странице загрузки программного обеспечения:

Интегрированные системы Applied Biosystems для генетического анализа ›