Экзонуклеаза I гидролизует одноцепочечную ДНК в направлении 3'→5', высвобождая

5'-мононуклеотиды и оставляя терминальный 5'-динуклеотид нетронутым. Гидролиз является процессивным и не может продолжаться, если 3'-конец фосфорилирован. Экзонуклеазу I можно использовать для измерения эндонуклеолитического расщепления ковалентно замкнутой кольцевой одноцепочечной ДНК, прореагировавшей с интересующей эндонуклеазой. Кроме того, активность ДНК-хеликазы можно измерить с помощью экзонуклеазы I.

Экзонуклеаза I особенно полезна при подготовке продуктов ПЦР для приложений, включающих методы секвенирования или маркировки. Как правило, избыточные праймеры и любая другая посторонняя одноцепочечная ДНК, присутствующая в продуктах ПЦР, будут мешать последующим ферментативным реакциям, включающим синтез ДНК. Гидролитические свойства экзонуклеазы I разрушают всю одноцепочечную ДНК, присутствующую в смеси ПЦР, что позволяет более эффективно использовать продукт в других приложениях. При сочетании с щелочной фосфатазой креветок (PN 78390) для дефосфорилирования dNTP использование альтернативных методов очистки, таких как колонки, гели или магнитное разделение, полностью исключается.

Для очистки ПЦР с экзонуклеазой I см. протокол USB ExoSAP-IT . Приобретение ExoSAP-IT предоставляет лицензию на методы очистки ПЦР с экзонуклеазой I и SAP.

Свойства:
Молекулярный вес: 55 кДа
Тепловая инактивация: 80 °C в течение 15 мин.
Разлагается до терминальных динуклеотидов.
Разрушает гликозилированную ДНК.
Оптимальная температура: 37 °C